四川分子生物学实验室建设要求
分子是生命活动的物质基础,生物分子的研究对人类的意义重大,在基因工程、基础医学和临床医学中起着重要作用。而分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性决定下游的所有步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物实验室时非常重要的。下面随卡迪诺来看看分子生物学实验室建设要求。
分子生物实验室在进行规划建设时,需严格参照《医学生物安全二级实验室技术标准》、《微生物和生物安全通用准则》和《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》等相关规定来进行。实验室的设计原则为:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。PCR分子生物实验室可分为以下几个部分:
试剂贮存和准备区
功能:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
试剂和用于标本制作的的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求。
标本制备区
该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA是cDNA的合成。本区的压力梯度要求为:相对与邻近区域的为正压,以避免从临近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会产生气溶胶污染所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。
扩增区
该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。
扩增产物分析区
该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
完备的实验室配套设施
完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、生物安全柜、离心机、加样器等。